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全健康論壇第22講:Oxford Nanopore測序技術(shù)最新研究進(jìn)展及場景應(yīng)用

作者:陳祎雯   發(fā)布時(shí)間 :2023年05月16日

為加強(qiáng)全球健康學(xué)院全健康公共技術(shù)平臺(tái)建設(shè),,有力推進(jìn)學(xué)院探索病原在人類-動(dòng)物-環(huán)境界面的發(fā)生與傳播機(jī)制,、防控救治,、資源調(diào)配等方面的科學(xué)研究,,近日全球健康學(xué)院配備了一套三代全基因組測序儀,。2023年5月5日上午,,學(xué)院特邀納米孔測序技術(shù)工程師:上海柏辰生物科技有限公司ONT項(xiàng)目組邵林主講全健康論壇第22講,,主題是“Oxford Nanopore測序技術(shù)最新研究進(jìn)展及場景應(yīng)用”,,全球健康各院系師生參加本次論壇,。

工程師首先向大家介紹了目前在科研過程中較為常見的幾項(xiàng)測序技術(shù),,概括了一代、二代、三代測序的各自特點(diǎn),。其中,,三代測序如PB,具有讀長較長,,準(zhǔn)確度較準(zhǔn),,但操作復(fù)雜、周期長的特點(diǎn),,同時(shí)指出Nanopore技術(shù)基于電流信號(hào)的方式,,具有讀長無限制,通量高,、準(zhǔn)確度較準(zhǔn),、且操作簡單的特點(diǎn),可以產(chǎn)生充足的基因組數(shù)據(jù)信息,。接著,,他展示了Nanopore測序技術(shù)在人類健康、技術(shù)研究,、動(dòng)植物基因組組裝,、病原微生物、環(huán)境微生物,、癌癥基因組以及教育等方面的具體應(yīng)用,。詳細(xì)闡述了Nanopore納米孔測序的建庫原理,其核心是蛋白納米孔,,人為改造后僅允許DNA/RNA單鏈通過,,通過馬達(dá)蛋白來進(jìn)行解旋和控制DNA/RNA單鏈通過納米孔的速度,過孔同時(shí)產(chǎn)生特異性的電流信號(hào),,通過內(nèi)置算法,,實(shí)時(shí)識(shí)別堿基。因此具有測序片段長度無限制,、實(shí)時(shí)分析的特點(diǎn),。

而后,工程師簡要描述了通過連接測序試劑盒來進(jìn)行DNA文庫制備的操作方法,,主要原理是提取高分子量基因組DNA進(jìn)行末端修復(fù),,再連接測序接頭,然后上機(jī)檢測,。此外,,就GridION儀器的詳細(xì)介紹、操作步驟包括芯片的質(zhì)檢,、上機(jī)操作,、儀器的控制和數(shù)據(jù)的轉(zhuǎn)化、實(shí)操運(yùn)行及軟件的使用展開了詳細(xì)的介紹。

最后,,工程師介紹了芯片的具體區(qū)域劃分及芯片的使用方法和注意事項(xiàng),,并針對(duì)大家提出的問題進(jìn)行了詳細(xì)的解答。在工程師的指導(dǎo)下,,全球健康師生完成了第一次的DNA文庫制備和上機(jī)操作,,取得圓滿成功。

此次論壇的順利開展豐富了學(xué)院師生對(duì)最新測序技術(shù)的了解,,為我院三代測序平臺(tái)的建立打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ),。下一步,全球健康學(xué)院公共技術(shù)平臺(tái)將繼續(xù)扎實(shí)開展人員培訓(xùn),,儲(chǔ)備技術(shù)力量,,為學(xué)院全健康科學(xué)研究提供強(qiáng)力支撐。





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