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流式平臺(tái)培訓(xùn)及考核流程

所有用戶必須參加流式平臺(tái)培訓(xùn)課程并通過考核后才能獲得使用資格。具體內(nèi)容包括三個(gè)部分：1.理論培訓(xùn) 2.上機(jī)實(shí)踐培訓(xùn) 3.考核,。

一． 理論培訓(xùn)：

1.時(shí)間：

每學(xué)期舉行兩次理論培訓(xùn),，具體時(shí)間請(qǐng)關(guān)注平臺(tái)通知。請(qǐng)任選其中一次參加,，提前一周將“培訓(xùn)申請(qǐng)表” (下載路徑:SII官網(wǎng)→公共平臺(tái)→流式平臺(tái)→培訓(xùn)申請(qǐng))交至流式平臺(tái)報(bào)名,。

2.內(nèi)容：

1)  流式細(xì)胞術(shù)基本原理和DIVA軟件使用介紹

2)  流式細(xì)胞儀的基本構(gòu)成及功能；

3)  流式抗體及熒光染料選擇與配置,；

4)  流式分析的基本原理及補(bǔ)償調(diào)節(jié),；

5)  常用實(shí)驗(yàn)對(duì)照設(shè)置；

6)  數(shù)據(jù)分析,；

7)  流式細(xì)胞儀應(yīng)用,。

8)  課前請(qǐng)自學(xué)以下內(nèi)容：

"Introduction to flow cytometery "web-based training on Invitrogen website http://media.invitrogen.com.edgesuite.net/tutorials/4Intro_Flow/player.html

二．上機(jī)實(shí)踐培訓(xùn)：（每次不超過5人）

1.申請(qǐng)者需具備以下條件：

1)  已經(jīng)完成理論培訓(xùn),；

2)  獲得所在課題組PI推薦，請(qǐng)?zhí)峁㏄I推薦信,；

3)  跟隨有經(jīng)驗(yàn)的用戶進(jìn)行流式細(xì)胞儀上機(jī)實(shí)習(xí)累計(jì)超過10小時(shí),，請(qǐng)?zhí)峁?shí)習(xí)證明信；

4)  需要承諾使用流式平臺(tái)超過4小時(shí)/月,。

* 滿足上述條件的人員請(qǐng)攜帶所需材料至流式平臺(tái)預(yù)約上機(jī)培訓(xùn),。

2. 時(shí)間： CantoII和FortessaX20培訓(xùn)時(shí)間為每周五。(如需使用平臺(tái)其他儀器,，請(qǐng)單獨(dú)聯(lián)系工作人員,。)

3. 內(nèi)容： 平臺(tái)使用管理?xiàng)l例和上機(jī)操作SOP?！　?/p>

1)  樣本準(zhǔn)備：必須預(yù)先使用70um Cell Strainer過濾樣本,。

2)  開機(jī)前準(zhǔn)備工作：檢查鞘液桶、廢液桶(關(guān)機(jī)液,、清洗液)狀態(tài),，能夠正確完成鞘液添加和廢液傾倒(防止線路螺旋導(dǎo)致傳感器破壞)；FortessaX20尤其需要注意檢查各處連接是否正確,，鞘液桶稱重等,。

3)  開機(jī)程序：打開BD FACSDiva軟件，儀器是否連接(選擇菜單欄Cytometer-Connect),；開機(jī)后CantoII,，F(xiàn)ortessa X20的正確排氣泡操作和上樣管路反沖操作。

4)  Diva軟件介紹：各個(gè)對(duì)話框功能及如何調(diào)出,；CantoII液流啟動(dòng)方法及啟動(dòng)成功后的標(biāo)識(shí),；如何建立文件夾、實(shí)驗(yàn)及熒光參數(shù)設(shè)置,；CantoII自動(dòng)上樣介紹及使用轉(zhuǎn)盤和不使用轉(zhuǎn)盤時(shí)的不同設(shè)置,；上樣倉倉門打開方式。

5)  CantoII 4色/FortessaX20 6色補(bǔ)償實(shí)訓(xùn),。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄及閾值設(shè)置,；上樣速度調(diào)節(jié)、設(shè)門方法等,；根據(jù)需要完成手動(dòng)補(bǔ)償和自動(dòng)補(bǔ)償操作,。

6)  數(shù)據(jù)分析

7)  關(guān)機(jī)程序：重點(diǎn)強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后必需認(rèn)真進(jìn)行儀器清洗，及CantoII液流關(guān)閉介紹,。

8)  關(guān)閉儀器電源,，傾倒廢液。

三．考核

包含理論考試和上機(jī)操作考試。

1.  理論考試：

書面閉卷考試,，包括簡(jiǎn)答題10道,，滿分100分，80分以上為通過,。內(nèi)容包含理論課和上機(jī)實(shí)踐課內(nèi)容。

* 請(qǐng)已經(jīng)完成上機(jī)培訓(xùn)的人員至平臺(tái)申請(qǐng)考試,。

2. 上機(jī)考試：

請(qǐng)自帶樣本,，要求準(zhǔn)備CantoII 4色/Fortessa X20 6色多色上機(jī)實(shí)驗(yàn)，熟練掌握上機(jī)前準(zhǔn)備,、開機(jī),、Diva軟件操作、補(bǔ)償設(shè)置,、工作表建立,、樣本收集及數(shù)據(jù)記錄、數(shù)據(jù)簡(jiǎn)單分析,、清洗流程和關(guān)機(jī)流程,。

* 理論考試通過后，可向平臺(tái)申請(qǐng)上機(jī)考試,。

3. 考核通過后,，需簽署“平臺(tái)使用同意書”，承諾依照平臺(tái)管理?xiàng)l例規(guī)范使用儀器,。

培訓(xùn)申請(qǐng)表 SII FLOW CYTOMETRY CORE TRAINING APPLICATION FORM