今年，國際期刊Molecular Therapy（IF 5.97）、International Journal of
Cancer（IF 4.734）和Human Gene Therapy（IF
4.104）等雜志相繼發(fā)表了基礎醫(yī)學院錢關祥教授課題組關于腺病毒腫瘤基因治療方面的系列研究成果。
博士生張赫采用特異殺傷p53缺陷腫瘤細胞的溶瘤腺病毒H101和針對過表達Bcl2的小干擾RNA同時靶向攻擊p53和Bcl2兩個變異點，以期最大限度的提高腫瘤靶向基因治療效果。結果表明，協(xié)同攻擊以后，對腫瘤細胞的毒性效果以及凋亡誘導率都明顯優(yōu)于單獨治療，此外，在動物實驗上發(fā)現該方法不僅可以抑制瘤體生長還能顯著提高實驗小鼠的生存期，個別小鼠的腫瘤甚至消失（Mol
Ther. 2009 Jan;17(1):57-64）。
小干擾RNA必須解決化學穩(wěn)定性和藥物釋放等問題，才可能被用作治療藥物。為了克服siRNA在實際應用上容易分解這一難題，博士生張建軍采用了一種新的策略，將一個人工合成的、可表達siRNA序列的Bcl2
microRNA
(smRNA)表達盒置于TRAIL基因的3’非翻譯區(qū)。同時采用人端粒酶逆轉錄酶啟動子(pTRT)來驅動TRAIL基因和Bcl-2
smRNA表達盒的共同表達。采用這種策略，已經驗證了pTRT啟動子能夠驅動Bcl-2
smRNA表達盒在腫瘤細胞中特異性的表達。Bcl-2
smRNA表達盒能夠以宿主細胞microRNA生物發(fā)生的內源性機制被加工成熟，并可高效的抑制腫瘤細胞中內源性bcl-2的表達，使腫瘤細胞對TRAIL誘導的凋亡變得更加敏感，而正常細胞則不受任何影響（Int
J Cancer. 2009 Aug 12 ，[Epub ahead of print]）。
在腫瘤基因治療中，有效性和安全性同樣重要，目前靶向性差已成為腫瘤基因治療發(fā)展過程中的一大瓶頸。博士生張萍在轉錄和翻譯雙調控的水平上對靶向性腫瘤基因治療策略進行了研究。首先，利用人端粒酶逆轉錄酶啟動子（hTRTP）的腫瘤細胞特異性，通過人工改造，獲得在腫瘤細胞中強烈驅動下游報告基因表達，而在正常細胞內下游報告基因不表達的啟動子。其次，克隆了腫瘤抑制基因hWWOX及缺氧誘導因子-1α的氧依賴降解結構域（ODD），構建了新的具有氧依賴降解特性融合蛋白的質粒。最后構建并包裝成轉錄和翻譯后雙調控的腺病毒載體，該腺病毒對缺氧狀態(tài)下的腫瘤細胞有明顯的誘導細胞凋亡作用；在缺氧嚴重的腫瘤中心部位表達良好，而在氧供相對正常的腫瘤邊緣部位表達明顯下降，荷瘤鼠模型上也觀察到了明顯的抑制腫瘤生長的效果。從而形成一種腫瘤基因治療的雙調控策略（Human
Gene Therapy. 2009 Sep 8. [Epub ahead of print]）。
上述研究得到973、國家自然基金和上海市科委等項目資助。該研究團隊的相關工作最近又得到973項目（2010CB529902）和兩項國家自然科學基金（10979034和30973663）的經費支持。
