今年，國(guó)際期刊Molecular Therapy（IF 5.97）,、International Journal of
Cancer（IF 4.734）和Human Gene Therapy（IF
4.104）等雜志相繼發(fā)表了基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院錢關(guān)祥教授課題組關(guān)于腺病毒腫瘤基因治療方面的系列研究成果,。
博士生張赫采用特異殺傷p53缺陷腫瘤細(xì)胞的溶瘤腺病毒H101和針對(duì)過(guò)表達(dá)Bcl2的小干擾RNA同時(shí)靶向攻擊p53和Bcl2兩個(gè)變異點(diǎn),，以期最大限度的提高腫瘤靶向基因治療效果,。結(jié)果表明,，協(xié)同攻擊以后,，對(duì)腫瘤細(xì)胞的毒性效果以及凋亡誘導(dǎo)率都明顯優(yōu)于單獨(dú)治療,，此外，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)上發(fā)現(xiàn)該方法不僅可以抑制瘤體生長(zhǎng)還能顯著提高實(shí)驗(yàn)小鼠的生存期,，個(gè)別小鼠的腫瘤甚至消失（Mol
Ther. 2009 Jan;17(1):57-64）,。
小干擾RNA必須解決化學(xué)穩(wěn)定性和藥物釋放等問(wèn)題，才可能被用作治療藥物,。為了克服siRNA在實(shí)際應(yīng)用上容易分解這一難題,，博士生張建軍采用了一種新的策略，將一個(gè)人工合成的,、可表達(dá)siRNA序列的Bcl2
microRNA
(smRNA)表達(dá)盒置于TRAIL基因的3’非翻譯區(qū),。同時(shí)采用人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶啟動(dòng)子(pTRT)來(lái)驅(qū)動(dòng)TRAIL基因和Bcl-2
smRNA表達(dá)盒的共同表達(dá)。采用這種策略,，已經(jīng)驗(yàn)證了pTRT啟動(dòng)子能夠驅(qū)動(dòng)Bcl-2
smRNA表達(dá)盒在腫瘤細(xì)胞中特異性的表達(dá),。Bcl-2
smRNA表達(dá)盒能夠以宿主細(xì)胞microRNA生物發(fā)生的內(nèi)源性機(jī)制被加工成熟，并可高效的抑制腫瘤細(xì)胞中內(nèi)源性bcl-2的表達(dá),，使腫瘤細(xì)胞對(duì)TRAIL誘導(dǎo)的凋亡變得更加敏感,，而正常細(xì)胞則不受任何影響（Int
J Cancer. 2009 Aug 12 ，[Epub ahead of print]）,。
在腫瘤基因治療中,，有效性和安全性同樣重要，目前靶向性差已成為腫瘤基因治療發(fā)展過(guò)程中的一大瓶頸,。博士生張萍在轉(zhuǎn)錄和翻譯雙調(diào)控的水平上對(duì)靶向性腫瘤基因治療策略進(jìn)行了研究,。首先，利用人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶啟動(dòng)子（hTRTP）的腫瘤細(xì)胞特異性,，通過(guò)人工改造,，獲得在腫瘤細(xì)胞中強(qiáng)烈驅(qū)動(dòng)下游報(bào)告基因表達(dá)，而在正常細(xì)胞內(nèi)下游報(bào)告基因不表達(dá)的啟動(dòng)子,。其次,，克隆了腫瘤抑制基因hWWOX及缺氧誘導(dǎo)因子-1α的氧依賴降解結(jié)構(gòu)域（ODD），構(gòu)建了新的具有氧依賴降解特性融合蛋白的質(zhì)粒,。最后構(gòu)建并包裝成轉(zhuǎn)錄和翻譯后雙調(diào)控的腺病毒載體,，該腺病毒對(duì)缺氧狀態(tài)下的腫瘤細(xì)胞有明顯的誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用,；在缺氧嚴(yán)重的腫瘤中心部位表達(dá)良好，而在氧供相對(duì)正常的腫瘤邊緣部位表達(dá)明顯下降,，荷瘤鼠模型上也觀察到了明顯的抑制腫瘤生長(zhǎng)的效果,。從而形成一種腫瘤基因治療的雙調(diào)控策略（Human
Gene Therapy. 2009 Sep 8. [Epub ahead of print]）。
上述研究得到973,、國(guó)家自然基金和上海市科委等項(xiàng)目資助,。該研究團(tuán)隊(duì)的相關(guān)工作最近又得到973項(xiàng)目（2010CB529902）和兩項(xiàng)國(guó)家自然科學(xué)基金（10979034和30973663）的經(jīng)費(fèi)支持。
