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實(shí)驗(yàn)室成員 PI：侯照遠(yuǎn) 教師：賈浩、王家敏 技術(shù)員：鄒秀群 研究生：張潔、張丹、張群、楊于權(quán)、嚴(yán)寒、李夢(mèng)瑩、張惠、杜亞寧、陳曉琳 目前的研究方向和進(jìn)展： 本課題組主要研究方向是在上皮-間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化（Epithelial-mesenchymal transition, EMT）和腫瘤轉(zhuǎn)移中基因網(wǎng)絡(luò)的表達(dá)與調(diào)控。具體研究對(duì)象是轉(zhuǎn)錄因子Snail抑制基因轉(zhuǎn)錄的分子機(jī)理。Snail屬于含有SNAG結(jié)構(gòu)域的鋅指（zinc-finger）蛋白家族成員。SNAG位于Snail分子的氨基端，具有抑制基因轉(zhuǎn)錄的功能。在胚胎發(fā)育和腫瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程中，Snail是誘導(dǎo)EMT的關(guān)鍵因子，是連接多種促腫瘤轉(zhuǎn)移信號(hào)通路的中心分子。因此，研究Snail 在細(xì)胞內(nèi)的作用機(jī)理不僅在理論上有助我們弄清楚腫瘤轉(zhuǎn)移的機(jī)制，在臨床上也能夠提供新的靶點(diǎn)進(jìn)行藥物設(shè)計(jì)和制定有效的治療方案。
Figure 1 A. Affinity purification of Ajuba-interacting proteins from 293 cells. B. Members of the protein arginine methyltransferase family. C. Depletion of Prmt5 in p19 cells results in up-regulation of E-cadherin, a known Snail target. D. ChIP assays show the binding of the Snail/Ajuba/Prmt5 complex to the proximal E-cadherin promoter. 當(dāng)前正在對(duì)組蛋白精氨酸甲基化在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用進(jìn)行探討。組蛋白精氨酸殘基甲基化對(duì)基因的表達(dá)與調(diào)控具有重要作用。但是相對(duì)于其它組蛋白修飾例如磷酸化，賴(lài)氨酸的甲基化等，精氨酸的甲基化研究沒(méi)有因以足夠的重視。精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶V（protein arginine methyltransferase 5, Prmt5）屬于II型精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶，除了能夠甲基化修飾組蛋白H2A, H3和H4上的精氨酸殘基，還能夠修飾非主蛋白底物例如轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)因子SPT5。Prmt5 通過(guò)甲基化修飾組蛋白來(lái)直接負(fù)調(diào)控基因表達(dá)，也能夠用過(guò)甲基化修飾來(lái)調(diào)控蛋白復(fù)合體的組裝來(lái)間接調(diào)控基因表達(dá)。我們前期研究發(fā)現(xiàn)了 Snail 同過(guò)結(jié)合Ajuba和 Prmt5來(lái)抑制轉(zhuǎn)錄，其中Ajuba 作為支架蛋白，連接Snail 和Prmt5共同形成一個(gè)多蛋白復(fù)合體。
Figure 2. Snail/Ajuba/Prmt5/14-3-3 multiprotein 我們已經(jīng)構(gòu)建了tet-on系統(tǒng)，能夠在HeLa 和MDA-231 細(xì)胞里誘導(dǎo)表達(dá)Snail。本項(xiàng)研究通過(guò)以Snail為模式來(lái)證明組蛋白精氨酸的甲基修飾在EMT發(fā)生過(guò)程中以及基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的重要作用，并進(jìn)一步探討表觀遺傳修飾特征可以作為惡性腫瘤轉(zhuǎn)移的診斷標(biāo)準(zhǔn)。 |
